يعد الجمع بين كالوريمتر المسح الضوئي التفاضلي وحيود الأشعة السينية معيارا ذهبيا لتغيرات الحالة الصلبة التي تم التحقيق فيها للمنتجات الصيدلانية القائمة على الدهون. المنهجية المدمجة هي أداة قوية لفحص تعدد الأشكال والنمو البلوري وانتقال الوجه للدهون جنبا إلى جنب مع الفحص والسلوك النهائي ورؤية الدواء مع مصفوفة الدهون. يمكن استخدام هذه المنهجية لفهم التفاعل بين الحالة الصلبة للدهون وأداء منتجه الصيدلاني.
يمكن أن تتراوح هذه المنتجات من تركيبات الدهون النانوية إلى أقراص المصفوفة. سيتم تنفيذ الإجراء من قبل جيرفريد لوشين إبنغروت. جيرفريد عالم من مختبرنا.
لبدء تشغيل إمدادات غاز النيتروجين وضبط الضغط بين 0.2 و 0.5 بار. قم بتشغيل كالوريمتر المسح الضوئي التفاضلي أو أداة DSC ومبدل العينات التلقائي. افتح البرنامج وانقر فوق الزر نعم لتنشيط وضع الاستعداد ، ثم انقر فوق عرض الإشارات.
اسمح بمعايرة الجهاز لمدة ساعة واحدة على الأقل. تطهير الفرن مع النيتروجين. انقر على أيقونة الطريقة الجديدة وانتقل إلى تعريف الطريقة.
عند فتح نافذة النظرة العامة ، قم بتنشيط خيار تعديل درجة الحرارة. انتقل إلى علامة تبويب الرأس وحدد الطريقة بالنقر فوق عينة. انتقل إلى برنامج درجة حرارة علامة التبويب.
حدد تطهير اثنين MFC و MFC الواقي كلاهما عند 50 ملليلتر في الدقيقة. اضبط وضع الاستعداد عند 20 درجة مئوية ، ودورة التسخين عند خمسة كلفن في الدقيقة من 20 درجة مئوية إلى أعلى من درجة حرارة انصهار الدهون متساوية الحرارة عند درجة الحرارة هذه لمدة خمس دقائق. دورة التبريد إلى صفر درجة مئوية عند خمسة كلفن في الدقيقة.
اضبط درجة حرارة إعادة ضبط الطوارئ النهائية على درجة حرارة 10 درجات مئوية أعلى من أعلى درجة حرارة للبرنامج ودرجة حرارة الاستعداد النهائية عند 20 درجة مئوية. انتقل إلى علامة التبويب المعايرة وحدد ملف درجة الحرارة والحساسية المناسب. احفظ الطريقة.
وزن ثلاثة إلى أربعة ملليغرام من كل عينة في بوتقات الألومنيوم وتسجيل الوزن الدقيق تحميلها في كل بوتقة. ختم بوتقة الألومنيوم بغطاء مثقوب. ضع البوتقات في درج أخذ العينات التلقائي وقم بتنشيط وضع أخذ العينات التلقائي في البرنامج وطريقة التحميل ذات الصلة لكل عينة.
املأ موضع العينة واسم العينة ووزن كل عينة وموضع البوتقة المرجعية في نافذة عرض درج العينة. ابدأ القياس. افتح البيانات الأولية باستخدام البرنامج لتحليل البيانات وزرع درجة الحرارة مقابل تدفق الحرارة بالنقر فوق الزر X الوقت ، X درجة الحرارة.
في النافذة المنبثقة ، انقر فوق إخفاء الأجزاء متساوي الحرارة. على الجانب الأيسر من الشاشة ، حدد فقط المنحنيات التي سيتم تحليلها. تحقق من السلوك الحراري للدهون كأحداث ماصة للحرارة وطاردة للحرارة للطاقة الممتصة أو المنبعثة في شكل حرارة على التوالي كدالة لدرجة الحرارة.
انقر على المنحنى متبوعا بالتقييم والمساحة. لحساب المحتوى الحراري للاندماج باعتباره المنطقة الواقعة أسفل منحنى الماصات للحرارة. حدد حدود التكامل عن طريق تحريك الخطوط الرأسية حول درجتين إلى ثلاث درجات مئوية قبل وبعد بداية ونقطة نهاية الذروة.
حدد خط أساس خطي لتكامل الذروة. تتناسب المساحة بين المنحنى وخط الأساس مع التغير في المحتوى الحراري. انقر فوق تطبيق لإنهاء الحساب.
وبالمثل، احسب الإنثالبي الناتج عن التبلور باعتباره المساحة الواقعة أسفل منحنى المواد الطاردة للحرارة. حدد بداية درجة حرارة الانصهار أو بداية T بالنقر فوق المنحنى المراد تحليله. ثم على التقييم والبداية.
حدد حدود القياس الكمي عن طريق تحريك الخطوط الرأسية إلى القسم الأكثر استقامة من المنحنى. عادة ما تكون هذه حوالي خمس إلى 10 درجات مئوية قبل وبعد الذروة. ثم حدد درجة حرارة الانصهار أو TM بالنقر فوق المنحنى المراد تحليله.
متبوعا بالتقييم والذروة ، فإن القيمة التي تم الحصول عليها هي الحد الأقصى للذروة. استخدم نظام تشتت الأشعة السينية الذي يتكون من كاميرا تركيز نقطة مثبتة على مولد أشعة سينية أنبوبي مغلق ومجهزة بوحدة تحكم وبرامج ذات صلة. استخدم كاشفين حساسين متمركزين خطيا لتغطية مناطق تشتت الأشعة السينية ذات الزاوية الصغيرة والواسعة.
قم بتشغيل نظام مياه التبريد على وحدة التحكم ومضخة التفريغ وصمامات الغاز ونظام التحكم في الطاقة والسلامة. ثم قم بتشغيل صمامات التحكم في الجهد والتطهير لأجهزة الكشف عند تدفق غاز يتراوح بين 10 إلى 20 ملليلتر في الدقيقة. قم بتشغيل أنبوب الأشعة السينية وخيار الاستعداد وانتظر حوالي 10 دقائق.
قم بإيقاف تشغيل وضع الاستعداد وقم بتشغيل أنبوب الأشعة السينية إلى الطاقة الكاملة ، والتي تزيد عن 50 كيلوفولت. انتظر لمدة 30 دقيقة على الأقل. ابدأ تشغيل برنامج التحكم وانقر فوق إعادة تعيين TPF.
ثم اختر مرشح التنغستن وحدد الموضع. انتقل إلى الموضع لإصلاح موضع مرشح التنغستن. املأ العينات في شعيرات زجاجية خاصة يبلغ قطرها الخارجي حوالي مليمترين لتجنب أي انحباس للهواء في الشعيرات الدموية.
أغلق الشعيرات الدموية الزجاجية بالشمع وضعها بعناية في حامل الشعيرات الدموية. قم بتشغيل المحرك لتدوير العينة وأغلق صمام التفريغ وانتظر حتى يصبح الضغط أقل من خمسة مليبار. في البرنامج ، حدد دقة موضع 1024 لكل من أجهزة الكشف واضبط وقت التعرض على 1،200 ثانية.
انقر فوق أدوات النقر لإعداد حدود الطاقة ، ثم انقر فوق تعيين حدود الطاقة ودقاتها وأعد التشغيل. قم بإعداد حدود الطاقة إلى نطاق مناسب بين 400 إلى 900. افتح مصراع الأمان وابدأ القياس.
تأكد من أن نافذة القياس تعرض 80 عدتا كحد أقصى في الثانية. إذا لم يتم إعطاء ذلك ، فقم بتكييف موضع المرشح. تصدير البيانات كملفات P00.
تتكون البيانات من شدة الإرسال والامتصاص مقابل رقم القناة. نقل البيانات للتقييم إلى برنامج إحصائي وتصحيح البيانات عن طريق تطبيع الشدة باستخدام كتلة التشتت المقاسة باستخدام مرشح التنغستن. قم بإنشاء مخطط للشدة الطبيعية مقابل ضعف زاوية الحيود .
استخدم وظيفة قارئ الشاشة للعثور على قمم الحيود في كل من تشتت الأشعة السينية بزاوية صغيرة أو SAXS ومناطق تشتت الأشعة السينية واسعة النطاق أو مناطق WAXS. قم بتطبيق معادلة التفاخر لحساب قمم الحيود التي تم الوصول إلى أقصى شدة لها في التفاعل أو التباعد. احسب نسب موضع الذروة لمنطقة SAXS لمعرفة التماثل البلوري للدهون واستخدم قمة الحيود الرئيسية لمنطقة SAXS لتحديد سمك البلورات.
قم بتركيب الذروة في دالة Gaussian عبر المربعات المؤجرة الكلاسيكية واحصل على العرض الكامل بنصف الحد الأقصى من خلال النقر على قمم التحليل وخطوط الأساس ومحلل الذروة والحوار المفتوح. في النافذة المنبثقة ، حدد الخيار Fit Peaks Pro. حدد خط أساس ثابت مع Y يساوي صفرا.
حدد قمة الحيود الرئيسية لمنطقة SAXS. انقر فوق التحكم في الملاءمة لتحديد معلمات ملاءمة الذروة. اختر وظيفة Gauss Amp.
اضبط المعلمات Y صفر XC1 و A1 على أنها ثابتة وتناسب البيانات. احصل على العرض الكامل بنصف الحد الأقصى من الملاءمة. أخيرا ، استخدم المعادلة الأكثر تأكيدا لحساب السماكة البلورية.
تظهر هنا تكوينات شوكة اللحن والكرسي لجزيء ثلاثي الجلسرين والخلية الفرعية والصفيحة والصفائح الدموية البلورية. تظهر الصورة التمثيلية أنماط التباعد القصير والتباعد الطويل لشكل ألفا لمناطق Tripalmitin و WAXS و SAXS. يظهر نفس الشيء بالنسبة للنموذج التجريبي في هذه الصورة.
يتم قياس المكون الصيدلاني النشط أو بلورات API المشفرة بأحادي ستيارات الجلسرين عبر DSC والأشعة السينية مباشرة بعد الطلاء وبعد ثلاثة أشهر من التخزين في ظل ظروف متسارعة. تظهر بيانات كالوريمتر المسح الضوئي التفاضلي (DSC) للعينات بعد ثلاثة أشهر من التخزين تحت التسارع أن ماصة الحرارة عند بداية T تساوي 55.7 درجة مئوية مع حدثين متداخلين عند 60.2 درجة مئوية لذوبان شكل ألفا المتبقي وعند TM يساوي 63.8 درجة مئوية كحدث رئيسي لذوبان شكل بيتا. يتم تأكيد الانتقال متعدد الأشكال باستخدام بيانات الأشعة السينية عن طريق اكتشاف المسافات D القصيرة النموذجية لشكل بيتا جنبا إلى جنب مع انخفاض سمك الصفيحة بسبب الإمالة الجزيئية.
كما لوحظ تغير كبير في ملامح الإطلاق والتي يمكن تفسيرها من خلال التحول الواضح متعدد الأشكال لشكل ألفا إلى شكل بيتا مع ترتيب خلية فرعية أكثر كثافة مما أدى إلى سطح طارد للماء. يتم هنا عرض بيانات DSC وبيانات الأشعة السينية وملف تعريف إصدار واجهة برمجة التطبيقات لبلورات API المشفرة باستخدام PG13C16C18 جزئيا مباشرة بعد الترميز وبعد ثلاثة أشهر من التخزين في ظل ظروف متسارعة. كشف تحليل كالوريمتر المسح الضوئي التفاضلي للعينات المخزنة عن مخططات حرارية لم تتغير ، والتي لا تصور أي تعدد الأشكال ولا فصل الطور.
تم تأكيد الحالة الصلبة المستقرة لجزئي PG3C16C18 من خلال أنماط الأشعة السينية. تظهر منطقة WAXS ذروة تتوافق مع تباعد قصير ل D يساوي 4.15 أنجستروم و T0 في العينات المخزنة المرتبطة بنموذج ألفا. كشفت منطقة SAXS عن قمة رئيسية غير متغيرة عند تباعد D طويل من D يساوي 63.7 أنجستروم يتوافق مع هيكل الصفيحة بتكوين L اثنين.
ينتج عن الحالة الصلبة المستقرة لمصفوفة الدهون ملف تعريف الإصدار المستقر ل API من الترميز. لتوفير بيانات الأشعة السينية عالية الجودة ، من المهم تجنب الانحباس بين الجسيمات عند ملء الشعيرات الدموية. أيضا لتحديد وقت التعرض الذي يعتمد على نوع العينة والمعدات المتاحة.
أثناء تطوير منتجات صيدلانية جديدة ، يتم استخدام فحص الحالة الصلبة للدهون وتفاعلها مع واجهة برمجة التطبيقات لتحديد عملية التصنيع المناسبة والتنبؤ باستقرار المنتج.
