يساهم خلل القلب والجهاز التنفسي في الوفاة المفاجئة بعد النوبة. لذلك ، لدراسة هذه الظاهرة ، تم تطبيق نهج متعدد الأنظمة على نموذج أرنب. تمكن هذه التقنية من الرصد والتحليل اللاحق المتزامن للوظيفة العصبية والقلبية والجهاز التنفسي للعديد من الأرانب المحيطة بالنوبات وعدم انتظام ضربات القلب والوفاة السابقة.
في حين أن المرض قد يكون في المقام الأول العصبية أو القلب، فإنه قد تشمل اضطرابات كهربائية في كل من الدماغ والقلب، مثل النوبات وعدم انتظام ضربات القلب، فضلا عن ضعف الجهاز التنفسي. قد يكون من الصعب العمل مع الأرانب بسبب قوة الساق الخلفية. الحرص على الحفاظ على الأرانب الهدوء عند تحريكها، وعند إرفاق الشاشات.
ابدأ بتوصيل الكمبيوتر بمكبر للصوت مع صندوق رأس 64 دبوس. لجعل كل دبوس ثامن على صندوق الرأس مرجعا ، قم بتعيين القطب المرجعي إلى مستقل. لزرع أقطاب تخطيط القلب، وتأمين أرنب في موقف سوبين مع الرأس في ركبتي المحقق وأقل من بقية الجسم.
مع المحقق الثاني نشر الفراء لفضح الجلد الكامنة، إدراج تحت الجلد 35 درجة زاوية عازمة الأقطاب الكهربائية في كل أكسيلا. مكان يؤدي على الصدر، الخلفي إلى الأطراف الأمامية اليمنى واليسارية. وعلى البطن، الأمامي إلى الطرف الخلفي الأيسر.
ثم ضع قطب قطب الأرض الأمامي إلى الطرف الخلفي الأيمن على البطن. عندما يتم وضع جميع خيوط تخطيط القلب بشكل صحيح ، قم بتأمين الأرنب في مقيد مناسب الحجم مع الأطراف الخلفية تحت الحيوان. باستخدام نهج زاوية 45 درجة، أدخل أقطاب تحت الجلد مباشرة دبوس في فروة الرأس.
ضع أحد الرصاص تخطيط كهربية الدماغ على الأمامي الأيمن، الأمامي الأيسر، القذالي الأيمن، والمناطق القذالي الأيسر من الرأس. ووضع نقطة مرجعية مركزية في النقطة المركزية بين الخيوط الأربعة الأخرى. تشغيل الأسلاك بين الأذنين، وربط فضفاضة لهم إلى المقيد وراء الرأس.
لمراقبة التنفس أثناء التجربة، قم بتوصيل مقياس أكسدة النبض بأذن واحدة فوق وريد الأذن الهامشي، وتأمين قناع الوجه بلطف مع أنابيب الكابنوغرافيا فوق فم الحيوان وأنفه. ثم إرفاق الطرف الآخر من الأنابيب إلى مراقبة العلامات الحيوية. لتسجيل الفيديو تخطيط كهربية الدماغ - ECG ، وفتح برنامج تخطيط كهربية الدماغ المناسبة المتاحة تجاريا وضبط الفيديو بحيث يمكن ملاحظة جميع الأرانب في مجال الرؤية.
إجراء تسجيل خط الأساس للحيوان لمدة لا تقل عن 10 إلى 20 دقيقة، أو حتى يستقر معدل ضربات القلب إلى 200 إلى 250 نبضة في الدقيقة لمدة خمس دقائق على الأقل. تعيين مرشح التردد المنخفض إلى هيرتز واحد ومرشح التردد العالي إلى 59 هيرتز. أضف ملاحظات مقفلة زمنيا في الوقت الفعلي للإشارة إلى توقيت التدخلات والأحداث العصبية القلبية والتحف الحركية أو المحققة.
للتحفيز photic، ضع مصدر الضوء مع عاكس دائري 30 سنتيمترا أمام الأرنب على مستوى العين مع كثافة فلاش تعيين إلى أقصى حد. ووضع مرآتين على كل جانب من الرأس، ومرآة واحدة خلف الأرنب، بحيث يدخل الضوء عيون الأرنب. قم بتوصيل الضوء بوحدة تحكم بمعدل وكثافة ومدة قابلة للتعديل.
مع تعيين المحفز photic إلى هيرتز واحد وفلاش على، وتسجيل الاستجابة لمدة 30 ثانية. قم بتغطية عيون الأرنب بقناع لمحاكاة أو التسبب في إغلاق العين وتحفيز لمدة 30 ثانية أخرى. بعد تسجيل العينين مفتوحتين والعينين مغلقة الاستجابة في كل تردد، إيقاف التحفيز photic لمدة 30 ثانية وتعيين وحدة تحكم لإعداد التردد المقبل.
بعد تسجيل لمدة 60 ثانية في كل تردد من 1 إلى 25 هيرتز في اثنين من فترات هيرتز، وانخفاض وتيرة من 60 إلى 25 هيرتز في خمس زيادات هيرتز، وسجل لمدة 30 ثانية مع عيون مفتوحة و 30 ثانية مع عيون مغلقة. في نهاية التجربة، قم بإزالة خيوط تخطيط كهربية الدماغ وECG من الأرنب وإعادة الحيوانات إلى أقفاصها المنزلية للحصول على الرعاية الروتينية من قبل موظفي تربية الحيوانات. قبل إعطاء الدواء، جمع 10 إلى 20 دقيقة من خط الأساس تخطيط كهربية الدماغ-تخطيط القلب الفيديو من الأرنب غير المعالجة كما هو موضح.
بالنسبة للإدارة الفموية لدواء مهم ، اخلط 0.3 ملليغرام لكل كيلوغرام من الدواء المثير للاهتمام في ثلاثة ملليلترات من صلصة التفاح من الدرجة الغذائية ، وحمل الخليط في حقنة فموية ثلاثة ملليلتر. رفع بلطف الشفة العليا من الأرنب، الشريحة غيض من الحقنة في جانب الفم الذي هو دون عائق من قبل أسنان الأرنب، وحقن كامل حجم صلصة التفاح المخدرات تكملها في فم الأرنب. ثم جمع ساعتين من بيانات الفيديو تخطيط كهربية الدماغ-ECG قبل العودة الأرنب إلى قفص المنزل للرعاية الروتينية.
قبل تسجيل استجابة تخطيط كهربية الدماغ -ECG لإدارة الدواء عن طريق الوريد ، حلق السطح الخلفي لأذن الأرنب واستخدم الإيثانول بنسبة 70٪ لتطهير الموقع ، وتمدد وريد الأذن الهامشي. بعناية، يمكن أن يلطخ وريد الأذن الهامشي بجناة وعائية قياس 25، ووضع قابس حقن في نهاية القسطرة. شريط جبيرة تم إنشاؤها من ثلاث قطع ملفوفة من الشاش إلى الأذن لتأمين القسطرة في مكان وعقد الأذن تستقيم.
حقن ملليلتر واحد من 10 وحدات USP لكل ملليلتر من المالحة الهيبارينية للحفاظ على براءة اختراع القسطرة. عند الانتهاء من تسجيل خط الأساس، حقن المالحة تكمل مع 1-10 ملليغرام لكل كيلوغرام من المخدرات ذات الأهمية في القسطرة مرة واحدة كل 10 دقائق. بعد كل جرعة، مراقبة بعناية الفيديو تخطيط كهربية الدماغ-ECG، قياس الأكسدة capnography، لأي تشوهات عصبية، القلب، الكهربائية والجهاز التنفسي أو الأدلة البصرية للنشاط الصرع.
لاحظ هذه التغييرات في الوقت الحقيقي، وكذلك أثناء تحليل ما بعد. لتحليل فيديو تخطيط القلب، استخدم برنامجا مناسبا متاحا تجاريا لتحديد فترات عدم انتظام دقات القلب أو عدم انتظام دقات القلب أو الدقات خارج الرحم أو عدم انتظام ضربات القلب الأخرى داخل بيانات تخطيط القلب. لتقليل كمية البيانات التي يجب مراجعتها، قم بإنشاء مخطط تاتشوجرام لزيادة السهولة التي يمكن بها تحديد فترات عدم انتظام دقات القلب أو بطء القلب أو مخالفات الفاصل الزمني ل RR.
لتحليل تخطيط كهربية الدماغ بالفيديو بعد تجربة إدارة الدواء ، انتقل بصريا من خلال تتبع تخطيط كهربية الدماغ للتمييز بين حركات الصرع مقابل الحركات غير الصرع لمدة دقيقة واحدة على الأقل بعد كل جرعة من الدواء. لتحليل تخطيط كهربية الدماغ الفيديو بعد تجربة التحفيز photic، إنشاء مؤامرة تحليل الطيفية في برنامج تحليل تخطيط كهربية الدماغ المناسبة. ثم تحليل يؤدي القذالي من تخطيط كهربية الدماغ لوجود وغياب إيقاع القيادة القذالي.
فإن إيقاع القيادة القذالي خلق ذروة في التحليل الطيفي الذي يتوافق مع وتيرة المحفز photic. تقييم مورفولوجيا تخطيط القلب يسمح للكشف عن معدلات ضربات القلب غير طبيعية، التوصيل، وأشكال موجة تخطيط القلب. ويمكن أيضا أن تستخدم آثار لتحديد معدل ضربات القلب، RR الفاصل الزمني، الفاصل الزمني للعلاقات العامة، مدة P، الفاصل الزمني QRS، QT الفاصل الزمني، QTc، الفاصل الزمني JT، وT-الذروة إلى الفاصل الزمني تي نهاية.
التسجيلات من يؤدي تخطيط كهربية الدماغ القذالي عادة ما تظهر سعة أعلى من تلك التي لوحظت لبيانات الرصاص الأمامي. والتردد السائد في جميع الخيوط يقاس عادة في نطاق دلتا. هنا، تظهر موجات مغزل النوم من تجربة أرنب تمثيلية.
المونتاج تخطيط كهربية الدماغ متعددة من فترة واحدة من النوم تثبت أن هذه الموجات تنشأ من وسط الرأس، وهو ما يتفق مع النتائج البشرية. بالإضافة إلى التغيرات العادية في تخطيط كهربية الدماغ، يمكن أيضا ملاحظة حركات الأرانب الواعية وغير الصرعية المختلفة أثناء التسجيلات الأساسية التي يمكن استخدامها لتمييز هذه البيانات عن إفرازات الصرع. من المهم وضع الرصاص تخطيط القلب بشكل آمن في الجلد للحفاظ على الأسلاك بعيدا عن الساقين والحرص على أن تظل تعلق الأقطاب الكهربائية عند نقل الأرانب إلى المقيد.
وسيمكن جهاز التسجيل المتعدد الأنظمة هذا من إجراء دراسات مستقبلية عن سلامة الأدوية وفعاليتها، وتسهيل فهم شامل لمختلف الأمراض المكتسبة والمرثة. هذه التقنية يلتقط مسار يحتمل أن تكون قاتلة، والخلل المتعدد بعد نوبة، الأمر الذي سيؤدي إلى فهم أفضل لآلية SUDEP.
