في هذا الفيديو، يتم توفير بروتوكول لأخذ عينات الدم المستمرة. سيتم قياس النشاط الإشعاعي في الدم بالتوازي مع PET /CT باستخدام تحويلة الشرياني الوريدي خارجة عن الكوربية. من خلال القيام بذلك ، يتم إنشاء وظيفة الإدخال الشرياني للكمية اللاحقة لبيانات PET / CT ويسمح في وقت لاحق على نمذجة حركية حيوية دقيقة.
المزايا الرئيسية لهذا البروتوكول هي أنه استنساخه، يولد الحد الأدنى من فقدان الدم، ويسهل دقة عالية في دقة زمنية لوظيفة الإدخال الشرياني. من الضروري معايرة جميع أجهزة القياس التي سيتم استخدامها لتحديد تركيز نشاط الدم. إثبات الإجراء سيكون آن مولر، فني من مختبرنا.
بعد التأكد من عدم الاستجابة لقرصة إصبع القدم في فأر صام لمدة 12 ساعة ، حلق الساق والفخذ على الجانب الجراحي من الحيوان وتطهير الجلد المكشوف بمطهر إضافي. تطبيق مرهم على عين الحيوان، ووضع مسبار المستقيم للمراقبة المستمرة والحفاظ على درجة حرارة الجسم. الشريط أطراف الجرذ على سطح العمل، وتطهير موقع التشغيل بمطهر مخاطي.
إجراء شق 20 ملليمترًا تقريبًا في الفخذ ، وتشريح طبقات الجلد الدقيقة لفضح الوريد الفخذي والشريان والأعصاب. ضع شعيرتين ناعمتين تحت الوريد الفخذي والشريان ، وligate الأوعية مع خيوط القعر. عقد السفن تحت التوتر مع المشبك البلدغ، واستخدام خيوط خياطة قريبة لتثوية السفينة مع المشابك البلدغ دون عقدة.
منع الوريد مع المشبك تمدد الأوعية الدموية القريبة من 2 إلى 3 ملليمترات من الغرز مع المشبك البلدغ، واستخدام مقص القرنية لجعل شق الذي هو 1/3 من قطر السفينة. شق الأوعية هو الخطوة الأكثر أهمية في بروتوكولنا. يرجى التأكد من استخدام أدوات الجراحة المجهرية، مثل مقص القرنية، والتأكد من قطع الوعاء بعناية بزاوية 45 درجة.
استخدام مسحة القطن العقيمة لإزالة تسرب الدم، وتمدد الوريد مع ملقط مملة. عقد السفينة مفتوحة، إدراج القسطرة شحذ في الوريد في الاتجاه القريب، حتى مقطع تمدد الأوعية الدموية. افتح مقطع تمدد الأوعية الدموية، وادفع القسطرة إلى 2 إلى 3 سنتيمترات أخرى.
إذا تم وضع القسطرة بشكل صحيح، سيتدفق الدم إلى القسطرة. قم بتأمين القسطرة مع العقدتين القريبتين. استخدام حقنة الأنسولين لشطف وpirate 100 ميكرولترات من الملحية heparinized من خلال القسطرة للتحقق من وظيفة القسطرة.
ثم ضع قسطرة في الشريان ، كما هو موضح للتو للوريد ، واغلق الساق بالخياطة. إثبات الإجراء سيكون جوانا فورستر، فني من مختبرنا. للحصول على الصورة، ضع الحيوان في وضع عرضة للرأس على منصة السرير المكوكية ونقل السرير المكوكي إلى وضع السرير الممتد للحقن.
قم بتوصيل القسطرة بنظام التحويلة، وابدأ المضخة ال peristaltic بمعدل تدفق 1.52 ملليلتر في الدقيقة الواحدة لملء نظام التحويلة بدم الحيوان. نقل سرير المكوك إلى وسط مجال الرؤية من التصوير المقطعي للانبعاثات البوزيترونية، أو PET، حلقة الكشف، وبدء نظام أخذ عينات الدم على الانترنت. ثم ابدأ تشغيل سير عمل PET/ctography أو CT.
بعد 60 ثانية, حقن 0.5 إلى ملليلتر واحد من ما يقرب من 22-megabecquerel جرعة من 18F-fluorodeoxyglucose عن طريق الوريد عبر T-قطعة. دافق قطعة تي مع حوالي 150 ميكرولترات من محلول ملحي heparinized. بالنسبة لحيازة الانبعاثات PET، حدد خيار الحصول حسب الوقت إلى 3، 600 ثانية وحدد F-18 كنظير للدراسة.
استخدام 350 إلى 650 كيلوelectron فولت كالمستوى الطاقة و 3، 438 نانو ثانية كنافذة توقيت. للحصول على اقتناء CT، حدد فحص التوهين في خيار الاستحواذ، وفي حقل إعدادات الإسقاط حدد 180 إسقاطًا لنصف إجمالي دوران. بالنسبة إلى إعدادات مجال العرض والدقة، حدد منخفضًا كتكبير وأربعة في أربعة للتجليد بطول مسح محوري 275 ملليمتر و3، 328 بكسل كحجم جهاز الشحن عبر المحاور.
في حقل إعدادات التعرض، قم بتعيين 500 ميكرومبير للتيار، 80 كيلوفولت للجهد، و 180 مللي ثانية لوقت التعرض. ثم الحصول على PET ديناميكية على مدى الدقائق ال 60 المقبلة، تليها الأشعة المقطعية في نهاية التصوير PET. بالنسبة إلى الرسم البياني لانبعاثات PET، قم بتعيين سلسلة من 20 إطارًا كـ الإطار الديناميكي وحدد طرح التأخير.
في حقل الإعدادات المتقدمة، حدد 128 كعرض sinogram وثلاثة كامتداد و79 كاختلاف الحلقة وتصحيح الوقت الميت. لإعادة إنشاء PET، استخدم تكبير التوقعات الفرعية ذات الأبعاد ثنائية الأبعاد وتطبيق وحفظ سونوجرام مبعثر مع أربعة تكرارات وفورييه لإعادة binning كخوارزمية إعادة البناء. ثم حدد 128 في 128 حجم المصفوفة ، واستخدام واحد كتكبير الصورة ، وحدد كل للإطارات وجميع لشرائح.
للحصول على عينات الدم اليدوية 30 و60 و90 و600 و1800 ثانية بعد بدء عملية التخيل، افتح أول صمام ثلاثي. جمع 100 ميكرولترات من الدم الشرياني في أنبوب جمع الدم الشعري EDTA 30 ثانية بعد حقن التتبع. لقياس نشاط الدم كله، تحميل العينة في عداد البئر للسماح لحساب نشاط الدم كله لكل نقطة الوقت من أخذ العينات الدم اليدوي في كيلوبكريل لكل ملليلتر.
لأخذ عينات الدم عبر الإنترنت، استخدم دليل الأنبوب لوضع الأنبوب في الكاشف، وابدأ برنامج عينات الدم. افتح واجهة الامتلاك، وتأكد من أن الكمبيوتر الخاص بإعداد أخذ عينات الدم عبر الإنترنت و PET/CT متزامنان وقتًا. اضغط على الزر ابدأ بالضبط 60 ثانية قبل حقن المتتبع للحصول على بيانات كافية لتصحيح الخلفية.
حفظ البيانات الأولية عبر الزر حفظ في قاعدة بيانات PMOD بعد القياس. لتصحيح ومعايرة بيانات الدم على الانترنت، والتحول إلى واجهة التصحيح وتمكين تصحيح الاضمحلال. حدد 18 F، وحدد وقت بدء الحصول على الصورة، مما يتيح الزر متوسط لإجراء تصحيح الخلفية.
قم بتنشيط المعايرة، وأدخل عامل المعايرة. احفظ بيانات الدم المصححة والمعايرة باستخدام زر حفظ TAC، وحدد الدم. crv ملف.
في بداية أخذ عينات الدم المستمرة، يمكن ملاحظة ذروة أولية في تركيز النشاط الإشعاعي تبدأ من حوالي خمس ثوان بعد حقن التتبع في التحليل عبر الإنترنت. بعد هذه الذروة ، ينخفض النشاط في الدم بسرعة ، ليصل إلى هضبة في حوالي 15 دقيقة. في بيانات أخذ عينات الدم اليدوية، تكون الذروة المكتشفة أصغر ولا يمكن تعريف الهضبة بسهولة.
في البيانات المستمدة من الصور، تكون ذروة الهضبة ونقطة انطلاقها مرئية بوضوح. ومع ذلك، فإن الحد الأقصى للذروة هو أصغر مقارنة مع بيانات أخذ عينات الدم المستمرة. في هذا دون الأمثل أخذ عينات من الدم المستمر، لم يكن من الممكن الحصول على البيانات خلال أول 3 1/2 دقيقة من أخذ العينات بسبب تخثر الدم.
بعد إزالة الجلطة، تم إعادة تشغيل التدفق في نظام الأنبوب واستمر القياس، وكشف عن ذروة في حوالي أربع دقائق لم تسجل الحد الأقصى من النشاط الإشعاعي في الدم. ومع ذلك، كانت العينات اليدوية للدم والتحليلات المستمدة من الصور لا تزال ممكنة في هذه العينات دون المثالية، وأظهرت نتائج مماثلة لتلك التي لوحظت للنتائج الصحيحة لأخذ عينات الدم المستمرة. الحفاظ على رفاهية الحيوان في الاعتبار خلال العملية برمتها، وإعداد نظام تحويلة بالضبط على النحو الموصى به، ومحاولة للحد من طول أنابيب.
يمكن استخدام البروتوكول في اختلاف آثار PET التشخيصية الجديدة ، وتوصيف نماذج الأمراض الجديدة ، وتقييم استجابة العلاج من العلاجات الجديدة في الإعداد قبل الفحص.
