بروتوكول الإجهاد تجميد المزمن لتحفيز السلوك مثل الاكتئاب في الفئران

تبدأ من خلال وضع الغرفة على ضوء في 200 لوكس باستخدام متر لوكس الرقمية. ضع الفأرة في قفص منفصل قبل أسبوع على الأقل من الاختبار، ووضع الماوس في غرفة الاختبار لمدة 30 دقيقة على الأقل قبل التجربة. أمسك ذيل الماوس بلطف لتجنب الشد الماوس، ثم ضعه بعناية على سطح خشن.

تغطية القيود مع منشفة بيضاء صغيرة ثم ضع بلطف الماوس في افتتاح الكبح، بحيث يدخل الماوس المُقيد طوعاً. بعد ذلك، ضع الإغلاق لكبح جماح الماوس كما ضيق قدر الإمكان، مع الحرص على تجنب تلف الجسم، مثل الذيل والقدمين والخصيتين. وأخيراً، أثناء التعرض للقيد، قياس وزن الجسم وتناول الطعام كل 48 ساعة.

قبل الاختبار ، تعود الفئران إلى وجود زجاجتين للشرب ، تحتوي إحداهما على 0.1 من السكروز الضرس والأخرى تحتوي على مياه عادية لمدة 48 ساعة. تبديل مواقف من الزجاجتين بعد 24 ساعة للحد من أي الخلط التي تنتجها التحيز الجانب. في اليوم الثالث حرمان الفئران من الماء لمدة 24 ساعة.

ثم في يوم التجربة يعرض الفئران لزجاجتين للشرب لمدة ست ساعات. بعد ثلاث ساعات، قم بالتبديل في موضع زجاجات المياه. سجل حجم في ملليلتر من محلول السكروز والمياه المستهلكة، ومن ثم حساب تقارب الحيوان إلى السكروز.

وأخيراً، حساب تفضيل السكروز كنسبة مئوية من حجم استهلاك السكروز على إجمالي استهلاك السوائل أثناء الاختبار. تبدأ من خلال جلب الإجهاد المزمن تقييد الماوس الناجمة عن في غرفة الاختبار على الأقل 30 دقيقة قبل بدء اختبار تعليق الذيل. تعيين ضوء الغرفة إلى ظروف قاتمة في 50 لوكس.

بعد ذلك، ضع الكاميرا على بعد حوالي 40 سنتيمترًا من الماوس. تعليق الماوس بقوة من الشريط الأفقي باستخدام شريط لاصق. بعد وضع الماوس في منتصف مربع تعليق بدء التسجيل، ومراقبة التعديلات السلوكية بشكل مستمر لمدة ست دقائق.

إذا كان الماوس يحاول تسلق ذيله استخدام عصا أو تسلق سدادة لمنعها من القيام بذلك. في نهاية التجربة نقل الماوس إلى قفص المنزل وإزالة الشريط بعناية من ذيله. وأخيرا ، استخدم برامج تتبع الفيديو لتحليل الوقت المتراكم من الفترات غير متحركة.

وتشير النتائج إلى انخفاض في وزن الجسم لمجموعة رابطة الدول المستقلة وأقل بكثير من تناول الطعام في اليوم الرابع. مقارنة بالضوابط، تم إظهار انخفاض لتفضيل السكروز في مجموعة رابطة الدول المستقلة، في حين كانت هناك زيادة كبيرة في وقت الجمود والكورتيكوستيرون. علاوة على ذلك، النظام الغذائي المكمل الجلوتامين يخفف من الاكتئاب مثل السلوكيات، كما هو مبين لوزن الجسم، وتناول الطعام، وتفضيل السكروز، والجمود، والكورتيكوستيرون.